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采样要求须知
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标本采集方法

 ● 静脉真空采血管采血法

       静脉采血多采用位于体表的浅静脉,通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉、小儿可采用颈外静脉或股静脉。采血过程中
  注意无菌操作,保证一人一针一管一带一巾一垫纸,防止交叉感染。
核对病人姓名、性别、年龄、诊断、检测项目等相关信息,备好采集试管。
1. 选择合适静脉:受检者取坐位或卧位,前臂水平伸直置于桌面枕垫上。暴露穿刺部位,选择容易固定,明显可见的肘部静脉。
2. 扎止血带:在穿刺点上方约6cm处系紧止血带,嘱受检者紧握拳头,使静脉充盈显露,易于穿刺。
3. 消毒:用复合碘消毒棉签自静脉穿刺处从内向外,顺时针方向消毒皮肤6-8公分。
4. 采血:拔除采血穿刺针的护套,以左手固定受检者前臂,右手拇指和食指持穿刺针,沿静脉走向使针头与皮肤成30度角斜行快
   速刺入皮肤,然后成5度角向前刺破静脉壁进入静脉腔,见回血后松止血带(止血带捆扎时间不超过1min),将刺塞针端直接
   刺穿真空采血管盖中央的胶塞中,血液自动流入试管内,如需多管血样,将刺塞端拔出,刺入另一真空采血管即可。达到采血
   量后,嘱受检者松拳,拔下刺塞端的采血试管。将消毒棉签压住穿刺孔,立即拔除穿刺针,嘱受检者继续按压针孔数分钟以防
   出血。
5. 记录采血时间、采血者签名(南京市第一医院的可在LIS中反映)
附:
1.采血时间:血液标本原则上是晨起在平静休息状态下的空腹血;需结果比对的项目最好在同一时间段采集,以免时间不同造成
            结果波动;有周期性以及时间上变化的项目,如皮质醇、ACTH、INS、HGH、女性激素等需按时间要求采集。
2.采血部位:一般为肘静脉、婴幼儿可选颈静脉用及股静脉。防止边输液边采血,勿在病人输液的同侧采血。
3.采血体位:一般取坐位或卧位。
4.止血带的应用:使用后1min内采血,见回血后马上松开。再次使用止血带时需换另一侧肘部静脉。

5.多管采血的顺序(试管帽):血培养—蓝色(凝血项目)--黄色(红色)—绿色—紫色—灰色—黑色。若无血培养项目,请将
                            黄色(红色)管作为首管采集,以消除采血针软管死腔对凝血项目的影响。
6.采血量:根据需要采集血量。
7.抗凝血:注意抗凝剂与血液的量要准确,并轻轻颠倒混匀,避免血液凝固。
8.如遇受检者发生晕针:应立即拔出针头,让其平卧。必要时可用拇指压掐或针刺人中、合谷等穴位,或嗅吸芳香酊等药物。

● 尿液标本采集方法

1.晨尿 
  清晨起床后在未进早餐和做其他运动之前排泄的尿液。使用清洁有盖容器(一次性容器为好),容器上应贴上标记,不可贴在
  盖子上。尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等异物混入。采集后2小时内送检。
2.随机尿
  随时排泄,无需做任何准备。其它要求同晨尿。
3.计时尿
   收集一段时间内的尿液标本,如3小时、12小时或24小时内的全部尿液。其它要求见晨尿及24h尿液标本的采集方法。

● 24小时尿液标本的采集方法

1. 留取24小时尿液(第一日清晨6:00排尿弃去,随后在正常饮食的情况下,将6:00后至次日清晨6:00为止,所有尿液全部留
   取在同一洁净容器内)。
2. 根据检测项目要求,留尿时请加入相应的防腐剂至清洁容器内,防止小便污染。
3. 记录24小时尿量(毫升数或重量)。
4. 混匀后取其中10毫升左右送检。

备注:U-FF、U-ALD、U-CA需用浓盐酸10ml防腐(每升尿加10ml浓盐酸),U-CP,肾功能全套需用甲苯5ml防腐(每100ml尿加0.5ml
甲苯)。

● 生殖器官分泌物标本采集方法
   1. 采集生殖拭子标本,要求患者在采样前2小时不能排尿。
   2. 男性:先清洁尿道口,将棉拭子伸入尿道约2cm,同方向旋转3-5周,停留5秒钟,取得分泌物(应略带粘膜)。
   3. 女性:阴道用无菌生理盐水棉球洗去宫颈口分泌物,再用无菌棉拭子伸入宫颈内,同方向旋转3-5周,停留5秒钟,取得宫
            颈分泌物。尿道用无菌生理盐水洗净尿道口,再用无菌棉拭子伸入尿道约2cm,同方向旋转3周,停留5秒钟,取得
            分泌物(应略带粘膜)。
   4. 将棉拭子置入无菌试管,将试管塞紧,密闭低温送检。
   5. 注意事项:
      ① 标本采集后立即送检,注意保温。
      ② 询问病人以前用药治疗情况,并注明以供检测时参考。
      ③ 取标本前24-48小时避免性交、灌洗或局部用药。

● 咽分泌物标本的采集方法

       清水漱口,用压舌板将舌头向下向外压,将咽拭子沾取少许无菌生理盐水,在咽后壁或者悬雍垂后侧涂抹数次,切勿接触
  口腔和舌粘膜,将咽拭子置入无菌试管,将试管塞紧送检。

● 痰液标本的采集方法(用自然咳痰法采集痰液)

   1. 晨痰:采集清晨第一口痰,清水漱口,用力咳出气管深处痰液,盛于有盖容器中,立即送检。
   
   2. 无痰少痰或痰浓不易咳出者:用45℃生理盐水雾化吸入,使痰易于咳出。小孩可轻压胸骨柄上方诱导咳嗽。
   3. 标本保存:碱化处理后冰冻保存。

● 毛细血管血的采集方法
   1. 采血部位,成人以左手无名指为宜,1岁以下婴幼儿通常用大拇指或足跟部两侧采血。
   2. 轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇棉球消毒局部皮肤,待干。
   3. 操作者用左手拇指和食指紧捏刺血部位两侧,右手持无菌采血针,自指尖内侧迅速穿刺。
   4. 用消毒干棉球擦去第一滴血,按需要依次采血。
   5. 采血完毕,用消毒干棉球压住伤口,止血。
   6. 注意事项: ① 采血部位必须无水肿、炎症或冻疮等血液循环障碍现象。
                 ② 穿刺深度一般以2.0~2.5mm为宜,稍加挤压血液即能流出。
                 ③ 采血时溢出的血液要能成滴。
                 ④ 必须用硅化玻璃管或专用塑料管(经过校正的20μl吸管),防止血小板粘附和聚集。

● 特殊项目的标本采集方法

  1. 皮质醇(COR)时间节律的采集方法
     COR的分泌存在时间节律变化,一般为早上8点(空腹)、下午4点、凌晨12点3个采血时间点。静脉采血2ml于带肝素抗凝剂
  的真空采血管中,轻轻颠倒摇匀5-8次,及时分离血浆并注明采血时间。一般与ACTH节律同步采集。

  2. 促肾上腺皮质激素(ACTH)时间节律的采集方法
     ACTH的分泌存在时间节律变化,一般为早上8点、下午4点、凌晨12点3个采血时间点。静脉采血2 ml于带EDTA抗凝剂的真空
  采血管中,轻轻颠倒摇匀5-8次,及时分离血浆并注明采血时间。一般与COR时间节律同步采集。

3. 血浆醛固酮(ALD)、肾素(PRA)、血管紧张素Ⅰ(AT-Ⅰ)、血管紧张素Ⅱ(AT-Ⅱ)标本采集方法
  ① 患者准备:
     β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂以及畄体激素、甘草等影响体内激素水平,一般要在停药后2周内测定PRA,利血平等代
 谢慢的药物应在停药3周测定。不适停药的病人改服胍以啶等影响PRA较小的降压药,钠摄入量影响机体PRA水平,故病人测定
 PRA前3天应适当减少食盐摄入量,最好同时测定取血前24小时尿钠含量,以供分析PRA结果时参考。
  ② 标本采集:
     血浆ALD:静脉采血3 ml注入肝素抗凝管中,轻轻颠倒混匀5-8次后立即离心分离血浆冰冻保存。
     血浆PRA、AT-Ⅰ、AT-Ⅱ:静脉采血3 ml注入本中心提供的专用抗凝管中,轻轻混匀5-8次后立即离心分离血浆冰冻保存。

附:标本采集有基础状态(卧位)和激发状态(立位)两种方法,由医生决定。
基础状态(卧位):指一夜睡眠后清晨起床前6—8点空腹卧床采血。
激发状态(立位)有三种方法:
a 于卧位采血后起床活动2小时末采血 (常用)。
b 低钠+立位:于卧位采血后给低钠饮食3天,第4天立位2小时后采立位血,此法不适于门诊病人。
c 速尿+立位:于卧位采血后立即肌注速尿,起床自由活动2小时,于2小时末采立位血,此法不适于门诊病人。
注意事项:
询问是否按医嘱停用降压药等影响测定结果的药物,女患者问是否停用避孕药。
夜间不要随便起床(特别是卧位采血前3小时),且不可吸烟看书或者互相谈笑,以保证卧位效果,卧位采血后方可起床。
有些患者比较紧张,采血前做好解释,消除其顾虑。
饮食中,钠钾摄入量可影响肾素水平,故最好对患者饮食中的钠钾含量加以固定。

4.胰岛素、C-肽兴奋试验采集方法
  ① 病人准备:试验前3 天每天进食碳水化合物不低于250-300g,且维持正常活动。影响试验的药物(如咖啡因、口服避孕药、
              水杨酸盐等)应在3天前停用。试验前病人应10-12小时不进食。
  ② 标本采集:清晨空腹静脉采血2 ml于带分离胶-促凝剂的真空采血管中,然后口服75g葡萄糖(加水200-300ml),再于给糖
              后0.5、1、2、3小时同上各取血一次(共5次),及时分离血清。
  ③ 注意事项:
    a 试验期间禁食禁水禁大运动量活动。
    b 儿童服用葡萄糖按体重1.75g/kg,总量不超过75g。
    c 宜在3-5分钟内服完,不宜过快或过慢,服后注意病人反应,特别是心肺功能不全者。
    d 试验过程中不能再进食其它饮料、食物和水。
    e 应与糖耐量试验(OGTT)同步检测。
  另外,胰高血糖兴奋试验采集方法:除采集试管为EDTA真空抗凝管外,其余同胰岛素、C-肽兴奋试验

5.临床核酸和基因扩增检验标本的采集方法及注意事项
  ① 标本采集时间:在疾病发展过程中,标本采集过早或者过晚都会造成假阴性结果。
  ② 标本采集部位的准备:泌尿生殖道分泌物标本采集前适度消毒,防止去掉或者破坏靶微生物。正确的采集方法是将拭子深入
     尿道口2~3厘米处用力转1~2圈。
  ③ 标本的类型和采集量:依据病原体的不同,选择相应的标本类型,如血液、痰液、分泌物等。采集量应适量。
  ④ 采样质量的评价:
     血浆标本可观察标本是否溶血、脂血及其程度。
     分泌物标本则从细胞组成、所需类型细胞的数量和核酸总量等方面进行评价。
     评价方法包括肉眼观察、显微镜下观察和化学分析等。

⑤ 采样以及运输容器:
       标本的采集材料如棉签、拭子等均应一次性使用运输容器为密闭的一次性无菌装置采样所用的防腐剂、抗凝剂及相关试
   剂材料不应对核酸扩增以及检测过程造成干扰。
⑥ 标本采集中的防污染:
       最好采用一次性无菌以及无核酸酶的材料,不用处理便可直接使用,采集中要特别注意污染,防止混入采集者的头发、
   表皮细胞、痰液等。
⑦ 标本运送:标本一经采集,尽可能快的送至实验室
⑧ 标本接收和保存:
       实验室标本接收编号后尽快在生物安全柜中分离出两管(一管用于检测,一管长期保存备查)。检测靶核酸为DNA的标
  本可在2~8°C下保存3天;检测靶核酸为RNA的标本应在-20°C以下冻存(具体保存时间见各检测项目)