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实验诊断
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C反应蛋白的临床应用
加入时间:2012/9/14 8:44:15 访问量:1592次  来源:标记免疫二组  作者:林艳丽
 

    C反应蛋白(C-reactive protein,CRP),1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现能在钙离子存在时与肺炎球菌C多糖起沉淀反应而得名,是人类重要的急性期反应蛋白,它是由肝脏合成,是一种可以结合肺炎球菌细胞壁C多糖蛋白质。故命名为C反应蛋白。CRP相对分子质量为(115~140)χ103的血清球蛋白,是5个完全相同的单体以非共价健结合而成的环状五球体,等电点为5.7~6.0,在人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中均可测出。

    近几年,随着CRP测定技术的发展,测定血清中的微量的、敏感的CRP成为可能(最低检测限为0.1 mg/L),其灵敏度大大增加,因此这个水平的CRP称为超敏C反应蛋白(hs-CRP)。美国心脏协会(AHA)/疾病控制中心已把它作为独立预测心血管疾病的重要指示。

    2009年4月我科最先开展C反应蛋白项目(参考值<3ug/ml),其方法为放射免疫检测法。原理:应用竞争机制原理,标准或样品中的C反应蛋白(CRP)和加入的125I-CRP共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I-CRP与抗体的结合量与标准或样品中CRP的含量呈一定的函数关系。用免疫沉淀剂(DR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,并计算相应结合率B/B0。用已知标准CRP含量与对应结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中CRP的含量。从2009年4月至今CRP项目标本量在逐年增加, 2012年8月至今共计8874件标本(主要用于心血管疾病的测定)。

    2012年7月根据门诊需要我科在东院引进了一台用速率散射比浊法测定C反应蛋白(参考值<5mg/L),其原理:速率散射比浊法是Sternberg 1977年创建的微量免疫沉淀法,是以测定溶液对光的散射程度来判断样品中抗原的含量,一定波长的光沿水平轴照射,碰到小颗粒的免疫复合物可导致光散射,散射强度与抗原抗体免疫复合物的含量成正比。此法是一种抗原结合反应的动态测定法,可快速、准确地测量样品中抗原,并且可在多种自动化检测上测定的结果。CRP样本测定只需20分钟就可出结果(主要用于感染性疾病等)。

    与感染关系:由于CRP在感染发生后6~8h即开始升高,24~48h达到高峰,高峰值可达正常的数百倍,在感染消除后其含量急骤下降,一周内可恢复正常。而CRP在病毒感染时无显著升高,这为疾病早期感染类型的鉴别提供了极其重要的依据。

    与心血管疾病的关系:

    一 心梗关系 hs-CRP是将来发生心血管疾病发病率和死亡率的预测指标。其次它也是一个很好的预后指标,动脉粥样硬化损伤、局部炎症的程度和范围引起的刺激反应可导致血清hs-CRP水平升高,急性心肌局部缺血患者可见CRP增高,随后心肌梗死,峰值在症状发作后36~96h,CRP>15mg/L是不稳定型心绞痛患者90天内病情恶化的强有力预测因子。欧洲心绞痛协作组报道,经2年随访发现CRP浓度与发生心绞痛的冠脉病变直接相关。

    二 脑梗关系 脑梗患者血清Hs-CRP水平升高,首先与脑组织的直接损伤有关,直接的创伤足以使细胞膜分离,暴露出胆碱磷酸分子和提供CRP的附着点,通过IL-6将信息传递给肝脏,刺激肝脏产生有活性的CRP,或因水肿广泛破坏正常组织,从而触发CRP的产生,其次,脑梗死后血液流变性的改变,血液剪应力的增加,可通过内皮细胞从病理上提高组织因子的产生,从而导致内皮细胞的炎症和功能不良发生的几率增加,血管内皮发生炎症后,进而导致包括Hs-CRP在内的急性时相反应蛋白升高,由此可见,血清Hs-CRP水平的升高与脑梗的发生密切相关。

    与其它疾病的关系:在类风湿早期和急性风湿时,血清中可达50mg/L,其阳性率为80%~90%。其原因:CRP是临床上最广泛使用的系统性炎症标志物之一,当机体受到感染或组织损伤时,IL-2和IL-6促使肝脏合成大量的CRP,CRP参与免疫应答,具有免疫调控作用。有学者认为CRP能发挥抗炎功能,是机体重要的抗炎介质之一,CRP是机体非特异性免疫功能的组成部分。反应性关节炎的患者通常都有一个4~8周前驱感染病史,细菌感染者的CRP水平与病情密切相关,凡是治愈或好转者CRP可以从较高水平降至正常,研究表明大量合成的CRP能与有荚膜的细菌结合,加强对它们的清除,在反应性关节炎病人的关节中存在针对细菌肽段活化的T淋巴细胞反应,可引发IL-2、IL-6、TNF-α等细胞因子的级联放大反应,这些因子使更多的炎症细胞趋化聚集,使局部产生炎症反应,同时滑膜可能辅助网状内皮系统,通过局部的巨噬细胞使循环中的细菌产生聚集,从而加强免疫反应。

     目前CRP项目已广泛用于临床,它一方面可以评估炎症、感染疾病活动性和疗效的监测,另方面在心血管方面也用途甚广如脑梗和心梗方面的检测,最近在肿瘤方面特别是肺癌方面有所发现,实验检测的结果也充分证明这一点。2011年经两年工作积累了大量数据,先后在放射免疫杂志上发表论文三篇题为《脑梗死患者血清CRP、肌酸激酶同工酶和血浆Hcy、纤维蛋白原的变化》和《急性心梗患者CRP、NT-proBNP和血脂的变化》以及《CRP、CYFRA21-1和NSE、在肺癌患者中的临床应用》。三篇论文发表让我们对这一项目前景有所展望,有待于更深入挖掘此项目。

     CRP项目为感染疾病和心血管疾病的诊治提供了临床上的依据。不久将来如果CRP项目在科研方面开展,将进一步提高这一项目的临床价值。而且CRP项目操作简单,快捷,能使病人和临床医生快速得到检测结果, 为疾病早期诊断及治疗也提供了很大的帮助。